Avaliacão do fenótipo refratário do CYP1a em Guarús para estudos de adaptação para a poluição em peixes
Autor: Roxana Margarita López Martínez (Currículo Lattes)
Resumo
A incapacidade de induzir o citocromo P4501A (CYP1A) por compostos semelhantes às dioxinas é uma característica bem estudada em populações de peixes que habitam em locais altamente contaminados na América do Norte. O objetivo deste estudo foi investigar a existência do fenótipo refratário do CYP1A em populações de guarús sul-americanos Poecilia vivipara e Phalloceros caudimaculatus de dois locais na cidade de Rio Grande (RS, Brasil) com diferentes níveis de Hidrocarbonetos Policíclicos Aromáticos (HPAs) no sedimento. Os alevinos de primeira geração (F1) foram expostos durante 24 horas às concentrações de 0, 10, 100, 1.000 e 10.000 M de beta-naftoflavona (BNF), um conhecido indutor do CYP1A. A expressão de mRNA do CYP1A foi determinada usando PCR em tempo real (RT-qPCR). Primeiramente, foi utilizado o endpoint usual para avaliação do fenótipo refratário do CYP1A, comparando peixes expostos a BNF com o controle. A concentração de 10 M evidenciou um fenótipo refratário do CYP1A em P. vivipara do local poluído (P), mas não foi evidenciado para concentrações mais elevadas de BNF e foi ausente para P. caudimaculatus. Então, foram usados dois endpoints alternativos para avaliação das capacidades de resposta alteradas do CYP1A em populações distintas: 1) a comparação estatística de EC50 e de curvas dose-resposta de BNF usando o pacote DRC do programa R e 2) comparação estatística do nível máximo de CYP1A através da exposição a 10.000 M BNF. Os valores de EC50 para os locais de referência (R) e P indicaram uma capacidade de indução do CYP1A alterada para P. vivipara (190,8 M e 15905,7 M BNF, respectivamente, p <0,05) mas não para P. caudimaculatus (220,2 e 265,2 M BNF, respectivamente p = 0,47). O nível do CYP1A a 10.000 M BNF foi maior na população do local R (P. vivipara 0,22 ± 0,06; P. caudimaculatus 0,39 ± 0,11) do que no local P (P. vivipara 0,02 ± 0,01; P. caudimaculatus 0,17 ± 0,03) para ambos guarús. Este é o primeiro estudo a avaliar sistematicamente o fenótipo refratário do CYP1A em guarús. Os resultados indicam que o valor de EC50 comparado estatisticamente e a indução máxima de CYP1A a 10.000 M de BNF são endpoints promissores para a identificação do fenótipo refratário de CYP1A em peixes.